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752分光光度計(jì)的原理和使用方法

更新時(shí)間：2024-12-24    點(diǎn)擊次數(shù)：4057
    752分光光度計(jì)具有自動(dòng)化程度高，功能多，可塑性強(qiáng)等特點(diǎn)，在生化分析，生命科學(xué)研究，特別是DNA分析定量方面可發(fā)揮重要的作用。

 

752分光光度計(jì)

    原理：

    752分光光度計(jì)由光源室、單色器、樣品室、光電管暗盒、電子系統(tǒng)及數(shù)字顯示器等部件組成，儀器內(nèi)部光路系統(tǒng)。從鎢燈或氫燈發(fā)出的連續(xù)輻射經(jīng)濾色片選擇聚光鏡聚光后投向單色器進(jìn)狹縫，此狹縫正好位于聚光鏡及單色器內(nèi)準(zhǔn)直鏡的焦平面上，因此進(jìn)入單色器的復(fù)合光通過(guò)平面反射鏡反射及準(zhǔn)直鏡變成平行光射向色散光柵。光柵將入射的復(fù)合光通過(guò)衍射作用形成按照一定順序均勻排列的連續(xù)單色光譜，此時(shí)單色光譜重新返回到準(zhǔn)直鏡，然后通過(guò)聚光原理成像在出射狹縫上。出射狹縫選出帶寬的單色光通過(guò)聚光鏡落在試樣室被測(cè)樣品中心，樣品吸收后透射的光經(jīng)光門射向光電管陰極面。根據(jù)光電效應(yīng)原理，會(huì)產(chǎn)生一股微弱的光電流。

    752分光光度計(jì)的使用方法：

    （1）將靈敏度旋鈕調(diào)到“1”檔（放大倍數(shù)zui小）。

    （2）打開電源開關(guān)，鎢燈點(diǎn)亮，預(yù)熱30min即可測(cè)定。若需用紫外光則打開“氫燈”開關(guān)，再按氫燈觸發(fā)按鈕，氫燈點(diǎn)亮，預(yù)熱30min后使用。

    （3）將選擇開關(guān)置于“T”。

    （4）打開試樣室蓋，調(diào)節(jié)0%旋鈕，使數(shù)字顯示為“0.000”。

    （5）調(diào)節(jié)波長(zhǎng)旋鈕，選擇所需測(cè)的波長(zhǎng)。

    （6）將裝有參比溶液和被測(cè)溶液的比色皿放入比色皿架中。

    （7）蓋上樣品室蓋，使光路通過(guò)參比溶液比色皿，調(diào)節(jié)透光率旋鈕，使數(shù)字顯示為100.0%（T）。如果顯示不到100.0%（T），可適當(dāng)增加靈敏度的檔數(shù)。然后將被測(cè)溶液置于光路中，數(shù)字顯示值即為被測(cè)溶液的透光率。

    （8）若不需測(cè)透光率，儀器顯示100.0%（T）后，將選擇開關(guān)調(diào)至“A”，調(diào)節(jié)吸光度旋鈕，使數(shù)字顯示為“000.0”。再將被測(cè)溶液置于光路后，數(shù)字顯示值即為溶液的吸光度。

    （9）若將選擇開關(guān)調(diào)至“C”，將已知標(biāo)定濃度的溶液置于光路，調(diào)節(jié)濃度旋鈕使數(shù)字顯示為標(biāo)定值，再將被測(cè)溶液置于光路，則可顯示出相應(yīng)的濃度值。

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